天津越腾生物技术有限公司
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植物ATP酶(ATPase)ELISA试剂盒
  • 品牌:越腾生物
  • 产地:国产
  • 型号:48T/96T
  • 货号:YT-P0365
  • 价格: ¥1200/盒
  • 发布日期: 2023-12-13
  • 更新日期: 2024-11-14
产品详请
产地 国产
保存条件 冷藏2-8°C
品牌 越腾生物
货号 YT-P0365
用途 仅供科研使用,不得用于临床诊断
检测方法 双抗体夹心法,间接法
保质期 180天
适应物种 人,大鼠,小鼠,猴,鸡、羊等
检测限 0.1 ng/ml
数量 90
包装规格 48T/96T
标记物 HRP标记
样本 血清,血浆,细胞培养上清
应用 科研实验
是否进口
植物ATP酶(ATPase)ELISA试剂盒
货号:YT-P0365
英文简称:(ATPase)ELISA试剂盒

定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中植物ATP酶(ATPase)ELISA试剂盒的浓度。
购买试剂盒,提供免费代测服务

操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


产品特点
一、、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型。



其他用品
1、酶标仪(450nm)
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒

样品的采集和储存
以下只是列出样品采集和保存的一般指南。所有样本采集保存过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清:4000rpm 条件下离心 20min,去除细胞颗粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反复冻融。
2、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm 条件下离心 20min,小心地分离出血清,保存在-20℃以下,避免反复冻融。
3、血浆:肝素,EDTA,或柠檬酸钠作为抗凝剂。在 4000rpm 条件下,离心 20 分钟取上清,血浆保存在-20℃以下,避免反复冻融。样本收集后,无法一次检测完毕,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温下解冻,确保样品均匀充分解冻。
4、组织匀浆:用预冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1: 9的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应 9 mL的 PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶剂)加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液 5000×g 离心 5-10 分钟,取上清检测。
5、细胞提取液:贴壁细胞用冷的 PBS 轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 离心 5 分钟后收集细胞;悬浮细 胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的 PBS 洗涤 3 次。每 1×106 个细胞中加入 150-200μLPBS 重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少 PBS 的体积)。将提取液于 1500×g 离心 10 分钟,取上清检测。
6、其他生物体液:1000×g 离心 20 分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
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免责声明 1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或小鼠体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。 2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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