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大鼠Janus激酶3(JAK3）elisa试剂盒
- 品牌：越腾生物
- 产地：国产
- 型号：48T/96T
- 货号：YT-R23001
- 价格： ￥1200/盒
- 发布日期： 2023-12-06
- 更新日期： 2024-11-25
产品详请
| 产地 | 国产 |
| 保存条件 | 冷藏2-8°C |
| 品牌 | 越腾生物 |
| 货号 | YT-R23001 |
| 用途 | 仅供科研使用,不得用于临床诊断 |
| 检测方法 | 双抗体夹心法,间接法 |
| 保质期 | 180天 |
| 适应物种 | 人,大鼠,小鼠,猴,鸡、羊等 |
| 检测限 | 0.1 ng/ml |
| 数量 | 90 |
| 包装规格 | 48T/96T |
| 标记物 | HRP标记 |
| 样本 | 血清,血浆,细胞培养上清 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 否 |
大鼠Janus激酶3(JAK3）elisa试剂盒
货号：YT-R23001
英文简称：(JAK3）elisa试剂盒
定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中大鼠Janus激酶3(JAK3）elisa试剂盒的浓度。
购买试剂盒，提供免费代测服务
使用试剂盒前，必须仔细阅读本说明书。
大鼠Janus激酶3(JAK3）elisa试剂盒实验原理 ：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗大鼠Janus激酶3(JAK3）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入大鼠Janus激酶3(JAK3）校准品和待测样本，再加入另一株 HRP 标记的抗大鼠Janus激酶3(JAK3）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固 相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，产 生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪 450nm 波长上测定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）与待测样品中大鼠Janus激酶3(JAK3）的浓 度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中大鼠Janus激酶3(JAK3）的 浓度
样品的采集和储存
以下只是列出样品采集和保存的一般指南。所有样本采集保存过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清：4000rpm 条件下离心 20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm 条件下离心 20min，小心地分离出血清，保存在-20℃以下，避免反复冻融。
3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在 4000rpm 条件下，离心 20 分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。样本收集后，无法一次检测完毕，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。
4、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1: 9的重量体积比，比如 1g 的组织样品对应 9 mL的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液 5000×g 离心 5-10 分钟，取上清检测。
5、细胞提取液：贴壁细胞用冷的 PBS 轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细 胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的 PBS 洗涤 3 次。每 1×106 个细胞中加入 150-200μLPBS 重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少 PBS 的体积)。将提取液于 1500×g 离心 10 分钟，取上清检测。
6、其他生物体液：1000×g 离心 20 分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
自备物品：
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒限制性：
1、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测前，请排除该因素。
2、通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
操作注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
免责声明 1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或小鼠体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。 2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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购买试剂盒，提供免费代测服务
使用试剂盒前，必须仔细阅读本说明书。
大鼠Janus激酶3(JAK3）elisa试剂盒实验原理 ：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗大鼠Janus激酶3(JAK3）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入大鼠Janus激酶3(JAK3）校准品和待测样本，再加入另一株 HRP 标记的抗大鼠Janus激酶3(JAK3）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固 相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP 催化下，产 生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪 450nm 波长上测定吸 光度（OD 值），吸光度（OD 值）与待测样品中大鼠Janus激酶3(JAK3）的浓 度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中大鼠Janus激酶3(JAK3）的 浓度
样品的采集和储存
以下只是列出样品采集和保存的一般指南。所有样本采集保存过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清：4000rpm 条件下离心 20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm 条件下离心 20min，小心地分离出血清，保存在-20℃以下，避免反复冻融。
3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。在 4000rpm 条件下，离心 20 分钟取上清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。样本收集后，无法一次检测完毕，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。
4、组织匀浆：用预冷的 PBS (0.01 M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1: 9的重量体积比，比如 1g 的组织样品对应 9 mL的 PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液 5000×g 离心 5-10 分钟，取上清检测。
5、细胞提取液：贴壁细胞用冷的 PBS 轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g 离心 5 分钟后收集细胞；悬浮细 胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的 PBS 洗涤 3 次。每 1×106 个细胞中加入 150-200μLPBS 重悬并通过反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少 PBS 的体积)。将提取液于 1500×g 离心 10 分钟，取上清检测。
6、其他生物体液：1000×g 离心 20 分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
自备物品：
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
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操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒限制性：
1、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测前，请排除该因素。
2、通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
操作注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
免责声明 1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或小鼠体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。 2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
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